弧菌顯色培養(yǎng)基用法

　　

　　稱取本品18.46g加入200ml蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱10-20分鐘。冷卻至45-50℃時，傾入無菌平皿。

　　

　　注意：制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥，可在37℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時。

　　

　　弧菌顯色培養(yǎng)基操作步驟

　　

　　1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液；

　　

　　2、取1ml樣品液加入9mlSCPB肉湯或堿性蛋白胨水中，37℃增菌培養(yǎng)18-24小時；

　　

　　3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液，劃線接種到副溶血性弧菌顯色培養(yǎng)基上，做2個平板；

　　

　　4、37℃培養(yǎng)18-24h，溶血性弧菌顯藍色至藍綠色，霍亂弧菌和其它弧菌顯無色，其它細菌顯黃色或無色且菌落很小；

　　

　　5、對可疑菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)12-16小時，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗。

　　

　　弧菌顯色培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項

　　

　　1.弧菌顯色培養(yǎng)基配方的選定

　　

　　同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外．一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料．加以比較核對．再依據(jù)自己的使用目的加以選用，記錄其來源。

　　

　　2．培養(yǎng)基的制備記錄

　　

　　每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)推各稱，配方及其來源．和各種成份的牌號。zui終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等，記錄應(yīng)復制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。

　　

　　3.弧菌顯色培養(yǎng)基成分的稱取

　　

　　培養(yǎng)基的各種成分必須稱取并要注意防止錯亂．一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側(cè)，每稱完一種成分即在配方上做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。*稱取完畢后．還應(yīng)進行一次檢查。

　　

　　4.弧菌顯色培養(yǎng)基各成份的混合和溶化

　　

　　培養(yǎng)基所用化學藥品均應(yīng)是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細菌不易生長。使用不銹鋼鍋加熱溶化．也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動，以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分*溶化．迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，zui后必須加以補足。

　　

　　5.培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整

　　

　　培養(yǎng)基各成分*溶解后，應(yīng)進行pH的初步調(diào)正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會有顯著的升高。因此，對這個步驟，操作者應(yīng)隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的zui終pH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。